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                细菌染色的程序流程有哪些?

                发布时间:2021-02-13 16:12人气:516

                  

                  一、涂片、干燥、固定、初染(媒染)、脱色、复染(1) 涂片:临床标本或液体培养物可直接涂抹于洁净的载玻片上,固体培养的细菌先在玻璃片上滴一滴〖生理盐水,然后取菌少许在盐水中磨匀,呈轻度混浊。涂好的菌膜大小一般以1cm2左右为宜。

                  (2)干燥  涂片【建议在室温下自然干燥,或将标本面向上,置于酒精灯火焰高处○慢慢烘干,切不可在火焰上↓烧干。

                  (3)固定  细菌的固定常用火焰加热法,即将上述已干的涂片在火焰中迅速通过3——5次,温度以手能摸时热而√不烫为度。目的在于杀死细菌,凝固※细胞质,改变细菌对★染料的通透性。

                  (4) 初染:不同的染色方法,所用染液也不同。染■液以覆盖菌膜为度。

                  (5) 媒染:通过媒染可增加染料和被染物质的亲和力。媒染剂还可用于固定之①后,亦≡可含在固定液或染液中。

                  (6) 脱色:此步骤主要目的是观察细菌与染料间结合的稳定程度,作为鉴别染色♂之用。

                  (7) 复染:细菌初染色被脱色后常以复染液复染,便于观察。复染液的颜色与初染◎液有明显不同。

                  二、常用染料原液配制

                  一般制备100ml纯酒精饱和溶液所需染料量:美兰2g——5g;结晶紫7g——14g;碱性复红3g——7g。

                  三、常用的染色方法

                  1、单染色法  即用一种@染料染色的方法。常用吕氏美兰或稀释石炭酸复红染液。

                  染液 :①吕氏美兰液々,美兰酒精饱和液30ml+0.01%KOH溶液70ml即成;②稀释石炭酸复红液  碱性复红酒精饱和液10ml+5%石炭酸溶液♀90ml,然后用蒸馏水作10倍稀释□即成。

                  2、菌种:大肠埃希菌普通斜面培养物。

                  3、染色方法:于已做好的涂片上滴加吕氏美兰或稀释石炭酸复红染液,染色1min,以水冲洗至无〇颜色流下为止,自然干燥或以远火烘干后镜检。

                  4、结果:以美№兰染色者菌体呈现兰色;以稀释石炭酸复红染色的菌体呈现红色。同。

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